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Diagnóstico de diarreas por C. difficile

El Clostridium difficile ya no es un clostridium. Ahora se clasifica como Clostridioides difficile. Se caracteriza por ser una bacteria muy difícil de aislar. Es muy poco competitiva y otros microorganismos van a provocar un sobrecrecimiento que hace muy difícil llevar a cabo su aislamiento.

Es un habitante natural del intestino tanto de la especie humana como de los animales domésticos. Ejerce su poder patógeno por tres tipos de toxinas: A, B (citolítica) y otra binaria que complica el proceso patogénico. Si  produce los tres tipos de toxinas se le denomina cepa toxigénica hipervirulenta, es decir, cepas con gran poder para provocar enfermedad.

Entre las cepas hipervirulentas se considera como el más patógeno el serotipo 027, seguido muy de cerca por el 078 que es mayoritario en España. Se encuentran muy difundidos en la naturaleza.

En porcinos da origen a diarrea neonatal. Se puede observar una diarrea profusa amarillenta con grumos de leche.

Diagnóstico:

Lo primero es realizar una evaluación conjunta.  El C. difficile está en el intestino del cerdo, como flora normal dentro la gran microbiota. Por lo tanto para que se provoque enfermedad tiene que haber una alteración de esa microbiota. Tratamiento con antibióticos, estrés, cambios de temperatura bruscos y por cambios nutricionales con alteraciones dentro de la alimentación son factores de susceptibilidad.

El diagnóstico incluye muestras de heces con escobillón sometido a shock con etanol al 70% o absoluto donde C. difficile es resistente. Se deja por 20 minutos para luego colocar sobre una placa y evaluar si hay crecimiento. A mayor número de placas el crecimiento puede evidenciarse mejor, es decir, que se incrementa la sensibilidad para el diagnóstico.

El diagnóstico mediante la siembra en medios enriquecidos es otra opción, pero con rangos de espera de resultados mucho mayor. También existe la detección directa de toxinas que no se recomiendan por obtener resultados muy indeseados. El PCR directo sobre la muestra es posible para detectar al  C. difficile, pero no la presencia de toxinas. Y la inmunocromatografía permite detectar la glutamato deshidrogenasa que es un componente de la pared de C. difficile.

Si las heces son recientes, pueden ser tomadas directamente del suelo por ser una bacteria esporulada. Los esporos resisten diversas condiciones ambientales. Paralelamente podemos hacer la siembra. Siempre se incuba en condiciones de anaerobiosis. Para realizar la siembra debemos volver a someter al choque con etanol, homogeneizar y centrifugar, para luego utilizar  el fondo que es lo que se siembra.

Muestras ambientales y muestras a matadero con simples escobillones puede no arrojar resultados fiables en el aislamiento. Para ello se recomienda el uso de esponjas especiales se empapan en agua de peptona. Estas muestras se dejan por 5 a 7 horas para revitalizar las bacterias y posteriormente poder lograr el aislamiento.

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