Artículo adaptado de: Jacobs AAC, et al. Efficacy of a novel inactivated Lawsonia intracellularis vaccine in pigs against experimental infection and under field conditions. Vaccine. doi: 10.1016/j.vaccine.2019.02.067
INTRODUCCIÓN
La enteritis proliferativa porcina, también conocida como ileítis, es una enfermedad infecciosa intestinal caracterizada por el engrosamiento de la mucosa intestinal del tramo distal del intestino delgado y del proximal del intestino grueso, como resultado de la proliferación de enterocitos asociada a la presencia de la bacteria intracelular Lawsonia intracellularis1.
Recientemente, se ha desarrollado una vacuna inactivada segura y eficaz frente a L. intracellularis, Porcilis® Lawsonia, que es combinable con Porcilis® PCV M Hyo.
Esta nueva vacuna inactivada consiste en una fracción de antígeno liofilizada y una fracción soluble que contiene el adyuvante.
Esta fracción de antígeno liofilizada para L. intracellularis se reconstituye justo antes de su uso en el disolvente y se administra de forma intramuscular mediante una sola dosis de 2 ml a los lechones a partir de las 3 semanas de vida.
Se plantearon tres estudios con un diseño similar (tabla 1). Para cada prueba se seleccionaron 75 lechones de una granja negativa a Mycoplasma hyopneumoniae (Mhyo) y PRRSV, sin historial de infecciones por L. intracellularis, que fueron distribuidos en tres grupos de 25 lechones cada uno.
En el GRUPO 1 se vacunaron una vez por vía intramuscular con 2 ml de Porcilis® Lawsonia a las 4 semanas de vida (estudios 1 y 2) o con 2 ml de Porcilis® Lawsonia mezclada con Porcilis® PCV M Hyo a las 5 semanas de vida (estudio 3).
En los tres estudios, el GRUPO 3 se dejó como control no vacunado.
4 semanas después de la vacunación (estudio 1),
17 semanas después de la vacunación (estudio 2) o
3 semanas después de la última vacunación (estudio 3).
El material de desafío se preparó a partir de raspados intestinales derivados de cerdos infectados por L. intracellularis (casos de campo).
0 = normal,
1 = diarrea leve,
2 = diarrea moderada,
3 = diarrea grave y/o con presencia de sangre;
también se describió cualquier otra anomalía.
Los animales que murieron o fueron eutanasiados debido a una infección grave por L. intracellularis se les asignó una puntuación 3 a cada uno de los puntos de observación restantes para permitir que la magnitud del efecto clínico se reconociera adecuadamente en el análisis.
Las puntuaciones clínicas diarias de los 13 a los 20 días después del desafío se totalizaron y promediaron por grupo.
Tres semanas después del desafío los cerdos fueron sacrificados y se realizó un examen post mortem. En la necropsia se examinaron los intestinos, en particular el íleon (los últimos 0,5 m del intestino delgado), para detectar lesiones indicativas de infección por L. intracellularis.
Se recogió una muestra fecal (del recto) y una muestra de íleon (5 cm por encima de la unión ileocecal) de cada animal para analizarlas en una qPCR específica de L. intracellularis.
Además, se recogió una muestra de íleon y se fijó en formol al 4 %, que luego se procesó en portaobjetos.
0 = normal;
0,5 = ligero engrosamiento;
1 = engrosamiento leve;
2 = moderado;
3 = grave engrosamiento y/o enrojecimiento;
4 = grave engrosamiento y/o enrojecimiento con presencia de fibrina y/o necrosis.
La puntuación de lesiones en el total del íleon se calculó mediante la multiplicación de la puntuación de la mucosa del íleon y el porcentaje de íleon afectado. El promedio de lesiones en el total del íleon se calculó para cada grupo de tratamiento.
0 = no se detectan anomalías,
0,5 = lesión dudosa,
1 = lesiones leves,
2 = lesiones moderadas,
3 = lesiones graves.
0 = sin evidencia de bacterias,
0,5 = presencia dudosa de bacterias,
1 = presencia de un número bajo de bacterias en el corte,
2 = presencia de un número moderado de bacterias,
3 = presencia de un alto número de bacterias en el corte.
Las muestras de suero se testaron en un ELISA interno de anticuerpos de L. intracellularis.
RESULTADOS
El día del desafío (4 semanas después de la vacunación) el grupo 1 mostró una seroconversión activa evidente mientras que los títulos de anticuerpos en los grupos 2 y 3 se mantuvieron a un nivel comparable a la prevacunación.
Todos los grupos desarrollaron un aumento en la respuesta de anticuerpos el día de la necropsia, 3 semanas después del desafío (figura 1).
El día del desafío (17 semanas después de la vacunación frente a L. intracellularis), los cerdos del grupo 1 mostraron una seroconversión evidente y activa, mientras que los títulos de anticuerpos medidos en los grupos 2 y 3 se mantuvieron en los niveles de antes de la vacunación.
Todos los grupos desarrollaron una mayor respuesta de anticuerpos el día de la necropsia, 3 semanas después del desafío (figura 2).
En la tercera semana después del desafío los animales control habían desarrollado signos clínicos por la infección de L. intracellularis caracterizados por diarrea, pérdida de peso y excreción de L. intracellularis en heces (tabla 2).
El día del desafío (3 semanas posvacunación), la seroconversión activa fue evidente en el grupo 1 mientras que los niveles de los grupos 2 y 3 se mantuvieron como antes de aplicar la vacuna.
Durante el estudio se tuvo que sacrificar a un animal del grupo 1 el día 7 posdesafío por problemas locomotores y un empeoramiento en su condición corporal.
La tercera semana posdesafío los animales del grupo control desarrollaron sintomatología clínica debido a la infección por L. intracellularis caracterizada por diarrea, una GMD subóptima y la excreción de L. intracellularis en heces (tabla 2).
Estos resultados van en línea con los publicados previamente por Roerink et al.13, que también demostraron una buena protección frente a una infección experimental por L. intracellularis mediante el uso de una vacuna inactivada de células enteras.
El objetivo de la segunda prueba de vacunación-desafío fue comparar la duración de la inmunidad de la vacuna inactivada con la de la vacuna viva atenuada.
A pesar de la gravedad del desafío, la vacuna inactivada indujo una protección robusta. La razón de las diferencias en susceptibilidad de los animales control podría estar relacionada con la edad de los animales ya que, por ejemplo, los animales de mayor edad son más susceptibles.
El objetivo del tercer ensayo de vacunación-desafío fue comparar la eficacia contra L. intracellularis de varias pautas de vacunación contra tres de los principales patógenos en cerdos de cebo.
Los resultados obtenidos en los estudios 1 y 2 demuestran un nivel de protección similar a los obtenidos en el estudio 3, lo que indica que los antígenos para PCV y M. hyo no tienen un efecto negativo sobre la eficacia de la vacuna de L. intracellularis.
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