Mycoplasma hyopneumoniae (Mhyo) y circovirus porcino tipo 2 (PCV2) son dos de los principales agentes que participan en el complejo respiratorio porcino (CRP). La vacunación de lechones frente a ambos agentes está ampliamente extendida y el uso de vacunas monodosis combinadas está en aumento, puesto que simplifica mucho la aplicación.
Aun siendo un virus ADN, PCV2 ha evolucionado de forma importante desde su identificación en la década de los ’90:
Con el objetivo de elaborar una vacuna combinada cuya fracción frente a PCV2 esté basada en el genotipo que en la actualidad presenta mayor prevalencia, ha llegado al mercado CIRBLOC® M Hyo, una vacuna que por primera vez engloba las siguientes características simultáneamente:
| El objetivo del siguiente estudio fue valorar la respuesta de esta nueva vacuna frente a la infección por PCV2d y 2 cepas distintas de Mhyo, realizando además un estudio comparativo con otras vacunas combinadas (RTU) o combinables (RTM) existentes en el mercado. |
MATERIAL Y MÉTODOS
Las pruebas se realizaron en instalaciones de ensayo con lechones SPF de 18 días de vida, que fueron distribuidos homogéneamente en 7 grupos de 20 lechones.
Los lechones se vacunaron a las 3 semanas de vida siguiendo las instrucciones de cada producto y se desafiaron a las 8 semanas de edad frente a PCV2d y Mhyo.
Se tomaron muestras periódicamente de suero, swabs rectales y fluidos orales y se realizaron necropsias a las 12 semanas de edad, tomando muestras de linfonodos y pulmón. En los pulmones se realizó una evaluación del nivel de lesiones compatibles con Mhyo.
RESULTADOS Y COMENTARIOS
RELACIONADOS CON Mhyo
SEROVONVERSIÓN
El nivel de anticuerpos frente a Mhyo se evaluó en distintas semanas durante el estudio mediante el kit IDVet ID Screen® Mycoplasma hyopneumoniae Competition ELISA.
Las vacunas A, B, D y F mostraron seropositividad 3 semanas postvacunación, indicando una respuesta humoral temprana, siendo las únicas en tener títulos medios por encima del umbral de positividad en el momento del desafío (5 semanas después de la vacunación). Después del desafío se observó un incremento muy parecido en todos los grupos vacunales. La vacuna E obtuvo los títulos medios más bajos durante todo el estudio, cercano al grupo control no vacunado desafiado.
| GRÁFICA 1
Cocientes muestra/positivo (S/P) en el suero de cerdos a lo largo del tiempo utilizando el ELISA de competencia IDVet ID Screen® para M. hyopneumoniae (por debajo de 50 S/P se considera positivo; Estudio A). |
SINTOMATOLOGÍA CLÍNICA
En cuanto a sintomatología clínica a nivel respiratorio, no se observó tos a los 42 y 63 días post desafío en ninguno de los grupos vacunados. Tan solo se detectó a los 53 días en los grupos no vacunados.
Todos los animales del grupo control presentaron lesiones pulmonares compatibles con Mhyo en el momento del sacrificio, a las 12 semanas de vida.
Todas las vacunas, excepto la vacuna C, redujeron significativamente estas lesiones.
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GRÁFICA 2 Puntuaciones medias ponderadas de lesiones pulmonares. Puntuaciones medias ponderadas de las lesiones pulmonares (PMPL) tras la provocación con Mhyo, tasa de positividad y diagrama de Box y Whisker de las puntuaciones individuales ponderadas de las lesiones pulmonares. (Letras mayúsculas diferentes indican diferencias estadísticamente significativas. *: MWLLS= Puntuación media ponderada de lesión pulmonar por cada grupo, tal como se describe en la Sección 2.5. Mhyo lung lesion scoring). |
RESULTADOS Y COMENTARIOS
RELACIONADOS CON PCV2
SEROCONVERSIÓN
Con el kit ELISA Ingezim Circo IgG se observó en los animales vacunados con las vacunas A y D una seroconversión más temprana y robusta, a los 21 y 34 días postvacunación.
Usando el Kit ELISA PCV2 BioChek (SK105), los animales vacunados con la vacuna A fueron los más rápidos en seroconvertir, siendo los únicos animales positivos a 21, 34 y 42 días postvacunación, antes del desafío, demostrando así la vacuna A una alta capacidad inmunogénica.
Con el resto de las vacunas solo se detectaron animales positivos después del desafío.
En el caso del PCV2 hay una asociación más clara entre seroconversión postvacunal y la eficacia vacunal que en el caso de Mhyo. Sin embargo, hay que tener en cuenta que la seroconversión no es el único indicador de una buena protección frente a PCV2.
| GRÁFICA 3
Títulos séricos de PCV2 en cerdos a lo largo del tiempo utilizando BioChek Porcine Circovirus Type 2 Antibody test kit ELISA (SK105) (un título superior a 1071 se considera positivo; Estudio B). |
| GRÁFICA 4
Títulos séricos de PCV2 en cerdos a lo largo del tiempo utilizando Ingezim Circo IgG (11.PCV.K.1) ELISA (Estudio B). |
VIREMIA
La reducción de la viremia de PCV2 se considera un parámetro muy relevante para determinar la eficacia vacunal.
Para los distintos tipos de muestra se detectó un pico de carga vírica en torno a las 2-3 semanas post desafío en el grupo control y en algunos grupos vacunales. Todas las vacunas redujeron la carga de PCV2 en suero, siendo la vacuna A y la vacuna D las únicas en controlar completamente la viremia, tal como muestra el gráfico de área bajo la curva (AUC) de PCV2d (Gráfica 6).
EXCRECIÓN VIRAL
Se tomaron muestras mediante escobillones rectales para evaluar la excreción del virus a través de las heces.
En general, las vacunas demostraron ser más eficientes en la reducción de viremia que en la reducción de la excreción.
LA VACUNA A LOGRÓ CONTROLAR TANTO LA VIREMIA COMO LA EXCRECIÓN DE FORMA MUY EFECTIVA
| GRÁFICA 5
Carga viral en suero tras el desafío con PCV2 (log10 copias/µL). |
| GRÁFICA 6
Diagrama de cajas y bigotes de la viremia entre grupos por área bajo la curva (AUC) utilizando un modelo mixto (letras mayúsculas diferentes indican diferencias estadísticamente significativas). |
| GRÁFICA 7
Excreción rectal de PCV2 mediante qPCR (log10 copias/µL). |
| GRÁFICA 8
Diagrama de cajas y bigotes de la excreción rectal entre grupos por área bajo la curva (AUC) utilizando un modelo mixto (letras mayúsculas diferentes indican diferencias estadísticamente significativas). |
| GRÁFICA 9
Carga viral en muestras de fluido oral recogidas semanalmente tras el desafío con PCV2d (log10 copias/µL) (1 wpc = 1 semana tras la provocación). |
| GRÁFICA 10
Diferencias de excreción entre los grupos por área bajo la curva (AUC) utilizando un modelo mixto en muestras de fluido oral (letras mayúsculas diferentes indican diferencias estadísticamente significativas). |
En fluidos orales, todas las vacunas redujeron la carga de PCV2d en relación con el control, pero la vacuna A redujo la carga de forma más significativa.
CARGA VÍRICA EN TEJIDOS
Casi todas las vacunas lograron reducir significativamente la carga de PCV2d en tejidos en relación con el grupo control, pero la vacuna A mostró las cargas más bajas.
| GRÁFICA 11
Número de copias/µl de PCV2 log10 en las muestras de órganos (nódulos linfáticos mediastínicos, mesentéricos e inguinales y pulmones) recogidas 4 semanas después del desafío (letras mayúsculas diferentes indican diferencias estadísticamente significativas). |
CONCLUSIONES
En esta prueba, la nueva vacuna combinada ready-to-use frente a PCV2 y Mhyo ha demostrado:
| En general, los resultados indican que la vacuna A (Cirbloc® M Hyo) es muy eficaz en el control de ambos agentes, lo que contribuye a combatir el complejo respiratorio porcino, las enfermedades asociadas a Circovirus Porcino tipo 2 y, por tanto, a lograr una mejor salud y productividad de las granjas porcinas. |
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