El virus de la influenza A (IAV) es uno de los patógenos más importantes que causan enfermedades respiratorias en los cerdos. cerdas nodrizas
La infección por IAV puede afectar parámetros de rendimiento como la ganancia diaria promedio, la eficiencia alimenticia (Donovan, 2010) y la mortalidad (Alvarez et al., 2015).
Además, el IAV tiene implicaciones para la salud pública debido al riesgo de transmisión bidireccional entre cerdos y personas, incluida la posible aparición de variantes con potencial pandémico (Vincent et al., 2014).
Muchos esfuerzos se han dirigido a controlar las infecciones por IAV en granjas porcinas con el objetivo de minimizar el impacto de IAV en la productividad.
Aunque la vacunación contra la influenza A puede reducir la gravedad clínica ( Sandbulte et al., 2015 ) y la transmisión (Romagosa et al., 2011), la vacunación por sí sola no es suficiente para prevenir completamente la transmisión.
Los lechones antes del destete desempeñan un papel central en el mantenimiento de las infecciones de influenza en los planteles de cría porcina (Díaz et al., 2015).
Entre los factores que contribuyen a la persistencia de las infecciones por IAV en los planteles reproductores y su posterior transmisión a los lechones se destacan:
- el sistema de producción y
- las prácticas de manejo que facilitan la transmisión del virus entre los lechones.
Vías de transmisión cerdas nodrizas
El virus de la influenza A se transmite principalmente por:
- contacto directo nariz- nariz (Brookes et al., 2009; Lange et al., 2009);
- contacto con fómites contaminados (Allerson et al., 2013) o;
- por aerosoles (Torremorell et al., 2012).
Prácticas de manejo que facilitan la transmisión cerdas nodrizas
Se sabe que prácticas como adopciones (Calderon-Diaz et al., 2017 ; Calderón Díaz et al., 2018), el flujo continuo (Torremorell et al., 2009) y la utilización de equipos contaminados transmiten IAV (Allerson et al. , 2013).
A su vez, los lechones infectados con IAV pueden propagarlo a otras granjas si se transportan a instalaciones fuera
del sitio durante el destete.
Es necesario comprender mejor cómo se infectan los lechones durante el período de lactancia para desarrollar medidas preventivas que disminuyan el riesgo de diseminación del IAV y mejoren la salud de los cerdos en
crecimiento.
Otra práctica de manejo que se ha demostrado experimentalmente que facilita la propagación de IAV entre camadas y contribuye al riesgo de infección de lechones es la utilización de cerdas nodrizas (Garrido-Mantilla et al., 2020).
Estas cerdas, generalmente, se seleccionan después del destete de su propia camada en función de un buen rendimiento durante la lactancia (Kirkden et al., 2013) y se les asigna una segunda camada (compuesta por lechones de otra/s cerda/s) de manera tal, de facilitar la supervivencia y el aumento de peso de estos. [registrados]
Se demostró, en un modelo experimental, que la transmisión de IAV entre una cerda nodriza y lechones
En este caso, se encontró que la piel de las mamas de la cerda era IAV positiva a pesar de que la cerda tenía
una diseminación limitada de IAV en el tracto respiratorio superior.
Además, la cerda IAV negativa del estudio también se infectó como resultado de la adopción de cerdos IAV positivos.
Estudio en condiciones de campo
Se realizó un estudio en condiciones de campo para determinar:
1 – si las camadas de lechones adoptados por cerdas nodrizas tenían una mayor probabilidad de ser IAV positivas en
comparación con las camadas criadas por sus madres biológicas, y
2 – la probabilidad de que una cerda nodriza se infectara con IAV como resultado de la lactancia de lechones adoptados infectados en el momento de la adopción.
Materiales y métodos
Cerdas
Para determinar el estado de IAV de la cerda en el momento del registro, se tomaron muestras de las cerdas nodrizas antes del movimiento y la adopción de los lechones, mediante un hisopado oral y una muestra tomada de piel de las mamas.
El muestreo se repitió al final del período de estudio cuando todos los lechones fueron destetados de la cerda.
También se tomaron muestras de las cerdas control en el momento del registro y en el destete utilizando el mismo protocolo.
Lechones
Para evaluar el estado de IAV de las camadas, se realizaron hisopados orales de seis lechones seleccionados al azar de cada una de las camadas de control y de las cerdas nodrizas a los dos y cuatro días después del registro (DPE), aproximadamente a los 14 días de lactancia y al destete (18-21 días de edad) (Tabla 1).
El muestreo de seis lechones por camada permite la detección de al menos un positivo asumiendo una prevalencia dentro de la camada del 40% utilizando una prueba con una sensibilidad del 90%, una especificidad del 100% y un nivel de confianza del 95%.
Ambiente
El muestreo de IAV en el ambiente se realizó mediante la recolección de partículas en el aire depositadas en láminas de papel de aluminio (Garrido-Mantilla et al., 2019a) colocadas en superficies ubicadas encima los cerdos en la sala, luego usando gasas estériles con medio de transporte para recolectar las partículas depositadas el papel de aluminio 1 hora después de la colocación.
Detección de IAV
Las muestras se procesaron para la extracción de ARN viral utilizando el procedimiento del procesador de partículas magnéticas (Ambion® MagMAX ™ AM1835, Viral RNA Isolation Kit; Applied Biosystems, Foster City, CA, EE. UU.) Y se analizaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (rRT-PCR) para detectar el gen de la matriz IAV (Spackman et al., 2003).
- Los hisopos orales recolectados de cada lechón se probaron en dos grupos de tres dentro de las camadas. Una camada se clasificó como positiva si al menos uno de los dos grupos de la camada dio positivo.
- Los hisopos orales recogidos de las cerdas, las gasas para la piel de las mamas y las muestras ambientales se analizaron individualmente.
Los resultados con valores de umbral del ciclo de rRT-PCR (ct) ≤37,50 se consideraron positivos y ct> 37,50 se categorizaron como negativos (Pardo et al., 2019 ).
Resultados
- Ocho cerdas registradas inicialmente en la cohorte de control y doce en la cohorte de cerdas nodrizas
se perdieron durante el seguimiento debido a muerte o prácticas de sacrificio de la granja. En
consecuencia, sus datos fueron eliminados del estudio. - Las tres granjas utilizadas en el estudio fueron positivas a IAV rRT-PCR durante todo el estudio, aunque a diferentes niveles.
- La prevalencia de camadas IAV al destete fue de 38,9% (21/54), 95,8% (46/48) y 51,6% (32/62) para las granjas uno, dos y tres, respectivamente.
Paridad de las cerdas y edad de las camadas
Hasta el 60% (107/178) de las cerdas nodrizas y de control en el estudio tenían paridades 1 a 3.
Las cerdas nodrizas tenían una edad promedio de camada de 10,2 días para la granja uno, 4,1 días para la granja dos y 5,9 días para la granja tres en comparación con la edad promedio de la camada de 9.1 días en la granja uno, 4.1
días en la granja dos y 5.8 días en la granja tres para las cerdas de control al momento de la identificación.
Las diferencias en la edad promedio de la camada al momento de la identificación entre las cerdas nodrizas y las de control en cada granja no fueron significativas dentro de las granjas (p> 0.05) usando la prueba t.
Infección por IAV
En el momento del registro, ninguna de las 85 cerdas control dio positivo en IAV por rRT-PCR en muestras orales en comparación con el 3,4% (3/89) de las cerdas nodrizas (χ 2 p = 0,05) (Tabla 2).
Sin embargo, la prevalencia de cerdas positivas al destete fue del 17,9% en el grupo control y del 14,9% en el grupo de cerdas nodrizas.
Hisopos orales
La proporción de hisopos orales positivos para IAV fue significativamente mayor al destete que al momento del registro tanto para el grupo control (prueba de McNemar p= 0.02) como para el grupo de cerdas nodrizas (prueba de McNemar p = 0.03).
Los resultados de los hisopados orales se interpretan como indicativos de la presencia del virus en el tracto respiratorio superior de la cerda y la posible diseminación del virus, aunque solo pudimos aislar el IAV de los
hisopados orales de las cerdas al destete.
Gasas para la piel de las mamas
Con respecto a las gasas para la piel de las mamas (Tabla 2), el 22,8% de las muestras recolectadas de las cerdas control en el momento del registro dieron positivo en comparación con el 75,8% de las gasas de las nodrizas (χ 2p = 0,02).
Al destete, el 60,2% de las gasas en el grupo de control y el 63,2% en el grupo de cerdas nodrizas dieron positivo en IAV rRT-PCR (χ 2 p = 0,07).
Los hallazgos de las gasas para las mamas se interpretaron como indicativos de infección en los lechones biológicos lactantes de la cerda: los lechones dejaron sus secreciones orales y nasales que contenían virus infeccioso viable en la piel de las mamas de la cerda mientras amamantaban.
Se obtuvo una mayor proporción de gasas de la piel de las mamas, positivas en las cerdas nodrizas en comparación con los controles al momento del registro.
Estos resultados tienen sentido dado que las cerdas nodrizas acababan de destetar a sus lechones y los lechones en edad de destete tienden a tener niveles más altos de infección por IAV en comparación con los lechones más
jóvenes.
Las secreciones dejadas en la piel de las mamas por los lechones recién destetados durante la lactancia podrían convertirse a su vez en una fuente de infección para los lechones de las camadas recién adoptadas.
Camadas
- En el momento del registro, la proporción de camadas positivas fue cercana al 12% tanto en las camadas de control como en las nodrizas (p = 0,16).
- Dos días después del registro, se observó una mayor proporción de camadas positivas en las camadas de cerdas nodrizas (30,2%) en comparación con las camadas de control (14,9).
- Cuatro días después del registro, el 23% del control y el 37% de las camadas de cerdas nodrizas dieron positivo.
- Aproximadamente, a los 14 días de lactancia, se observó una diferencia menor entre la proporción de control
positivo (46,8%) y las camadas de cerdas nodrizas (59,4%). - Finalmente, al destete, el 64% de las camadas de control y el 56,4% de las camadas de cerdas nodrizas dieron positivo para IAV.
Sin embargo, la prevalencia de camadas positivas al destete fue alta y similar entre cerdas control y nodrizas, lo que indica un inicio tardío de la infección en las camadas de las cerdas control si consideramos que las infecciones por
IAV suelen durar entre 5-7 días en los cerdos (Vincent y Van Reeth, 2012).
Es importante tener en cuenta que aproximadamente el 12% de las camadas de cerdas control y nodrizas en el momento del registro dieron positivas a IAV rRT-PCR.
Además, el 22% de las cerdas de control habían resultado con la piel de las mamas contaminada para IAV en el momento del registro, ninguna de las cuales resultó positiva en los hisopos orales.
Así, la demora observada en el inicio de la infección en las camadas de las cerdas control posiblemente se debió a la disminución de la prevalencia en las camadas control o a que la fuente de infección fue el ambiente de la sala.
De las 22 camadas positivas totales en el momento del registro:
- nueve (cinco y cuatro camadas de los grupos de cerdas control y nodrizas, respectivamente) permanecieron
positivas hasta el destete (Fig.1). - Ocho camadas dieron positivo al momento del registro, pero dieron negativo en muestreos posteriores.
- Por último, tres de las camadas que dieron positivo en el registro, pero negativo inmediatamente después,
se volvieron positivas al destete.
La principal diferencia observada entre el patrón de infección de las cerdas nodrizas y las de control fue que hubo menos camadas de cerdas nodrizas infectadas al destete en comparación con las cerdas control.
Ambiente
Finalmente, el 39,13% de las muestras ambientales dieron positivas a IAV rRT-PCR en el momento del registro en comparación con el 78,43% en el destete (prueba de McNemar p = 0,04) (Tabla 3):
Conclusiones
Los resultados del estudio proporcionan una fuerte evidencia de que las cerdas nodrizas desempeñan un papel en la transmisión del IAV a los lechones y en el mantenimiento de las infecciones por IAV en los planteles reproductores.
El incremento en el riesgo de transmisión del IAV atribuible al uso de nodrizas probablemente se verá afectado por la frecuencia de esta práctica en las granjas, dado que entre el 4 y el 23% de las cerdas en una semana o grupo de partos son nodrizas (Garrido Mantilla et al., datos no publicados), y las estrategias utilizadas para formar camadas adoptadas.
En general, este estudio aumenta la comprensión de las infecciones por IAV en los cerdos y proporciona información sobre las estrategias de manejo para controlar o minimizar la transmisión de IAV en las granjas.
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