Utilidad de los Marcadores de Activación en linfocitos T porcinos

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Un reciente estudio llevado a cabo por investigadores del Instituto Pirbright y la Universidad de Reading en el Reino Unido y la Universidad de Setsunan en Japón ha explorado el uso de marcadores inducidos por activación (AIMs,del inglés, Activation induced markers) en linfocitos T porcinos mediante citometría de flujo.

Los AIMs son comúnmente analizados para identificar linfocitos T memoria humanos reactivados, pero su uso en cerdos aún no es muy común.

El equipo diseñó un panel de citometría de flujo de varios colores que incluía anticuerpos específicos para cerdos o con reactividad cruzada contra CD25, CD69, CD40L (CD154) e ICOS (CD278), combinados con marcadores de línea/superficie contra CD3, CD4 y CD8α.

También se incluyó un anticuerpo contra el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) para estudiar la correlación entre la expresión de AIMs y la producción de esta citoquina.

El panel se probó en células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) estimuladas con diferentes agentes, como el forbol 12-miristato 13-acetato (PMA)/ionomicina, enterotoxina B de Staphylococcus (SEB) o PBMCs de cerdos convalecientes del virus de la peste porcina africana (PPA), que fueron restimuladas con el virus homólogo.

Los resultados mostraron que:

La estimulación con PMA/ionomicina resultó en un aumento masivo de los linfocitos T que coexpresaban CD25/CD69, de los cuales solo un subconjunto producía TNF-α.
La expresión de CD40L estuvo asociada en gran medida con la producción de TNF-α.
La estimulación con SEB provocó una expresión de AIMs sustancialmente menor que PMA/ionomicina, pero también se identificaron linfocitos T que expresaban CD25/CD69 y no producían TNF-α.

Además, se identificaron linfocitos T CD40L-positivos solos y linfocitos T CD25+CD69+CD40L+TNF-α-.

En las células T re-estimuladas con PPA, la producción de TNF-α estuvo asociada con una proporción sustancial de linfocitos T que expresaban AIMs, pero también se identificaron linfocitos T CD25+CD69+TNF-α- reactivos al PPA.

Este estudio demuestra que la combinación de AIMs probados permitirá la identificación de linfocitos T cebados más allá de los paneles de citoquinas comúnmente utilizados, mejorando la capacidad para identificar la plena amplitud de linfocitos T específicos de antígenos en cerdos.

Leer estudio completo: Moorton, M. et al. (2024) ‘Investigation of activation-induced markers (AIMs) in porcine T cells by flow cytometry’, Frontiers in Veterinary Science, 11. doi: 10.3389/fvets.2024.1390486..