Utilidad de los Marcadores de Activación en linfocitos T porcinos

El equipo diseñó un panel de citometría de flujo de varios colores que incluía anticuerpos específicos para cerdos o con reactividad cruzada contra CD25, CD69, CD40L (CD154) e ICOS (CD278), combinados con marcadores de línea/superficie contra CD3, CD4 y CD8α.

• También se incluyó un anticuerpo contra el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) para estudiar la correlación entre la expresión de AIMs y la producción de esta citoquina.

El panel se probó en células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) estimuladas con diferentes agentes, como el forbol 12-miristato 13-acetato (PMA)/ionomicina, enterotoxina B de Staphylococcus (SEB) o PBMCs de cerdos convalecientes del virus de la peste porcina africana (PPA), que fueron restimuladas con el virus homólogo.

Los resultados mostraron que:

• La estimulación con PMA/ionomicina resultó en un aumento masivo de los linfocitos T que coexpresaban CD25/CD69, de los cuales solo un subconjunto producía TNF-α.
• La expresión de CD40L estuvo asociada en gran medida con la producción de TNF-α.
• La estimulación con SEB provocó una expresión de AIMs sustancialmente menor que PMA/ionomicina, pero también se identificaron linfocitos T que expresaban CD25/CD69 y no producían TNF-α.

Además, se identificaron linfocitos T CD40L-positivos solos y linfocitos T CD25+CD69+CD40L+TNF-α-.

En las células T re-estimuladas con PPA, la producción de TNF-α estuvo asociada con una proporción sustancial de linfocitos T que expresaban AIMs, pero también se identificaron linfocitos T CD25+CD69+TNF-α- reactivos al PPA.

Leer estudio completo: Moorton, M. et al. (2024) ‘Investigation of activation-induced markers (AIMs) in porcine T cells by flow cytometry’, Frontiers in Veterinary Science, 11. doi: 10.3389/fvets.2024.1390486..