Abordaje diagnóstico de las micotoxicosis en ganado porcino

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Bárbara Garuz

Exopol S.L.
Bárbara Garuz

Gema Chacón

Veterinaria Responsable del Dpto. Diagnóstico en EXOPOL
Gema Chacón

Sebastián Samus

Exopol S.L.
Sebastián Samus

Las micotoxinas representan una amenaza significativa para la producción porcina, siendo su control esencial para prevenir sus efectos negativos, tanto agudos como crónicos, en la salud de los cerdos. Este artículo explora las principales micotoxinas que afectan al ganado porcino, los métodos de diagnóstico disponibles y la importancia de un control riguroso para mitigar su impacto.

Las micotoxinas son compuestos tóxicos producidos por hongos y suponen una amenaza constante para la salud y rentabilidad de la producción porcina.

La formación de micotoxinas se puede producir antes o después de la cosecha de cereales y otros alimentos, estando favorecida por ambientes húmedos y cálidos.

LOS CERDOS, DEBIDO A SU SISTEMA DIGESTIVO Y TIPO DE ALIMENTACIÓN, SON ESPECIALMENTE SENSIBLES A LAS MICOTOXINAS, HACIENDO QUE SU CONTROL SEA UN ASPECTO CRUCIAL

Existen más de 500 micotoxinas descritas, siendo importante tener en cuenta que:
Suelen producirse efectos sinérgicos entre ellas, es decir, la presencia de varias micotoxinas en el alimento puede tener un efecto nocivo mayor que la suma de los efectos individuales de cada una de ellas.
Lo más habitual es encontrar efectos crónicos asociados a la exposición a micotoxinas durante largos periodos de tiempo que, incluso a niveles bajos, puede provocar sintomatología clínica en los animales.

PRINCIPALES MICOTOXINAS QUE AFECTAN AL GANADO PORCINO

  • Tipo de toxinas.
  • Concentración en el alimento.
  • Combinación con otras micotoxinas.
  • Edad de los animales.
  • Estado reproductivo.

No obstante, en ocasiones la sintomatología es inespecífica pudiendo, actuar como factor predisponente de procesos infecciosos.

Las principales micotoxinas que afecta a porcino y sintomatología asociada se muestran en la Tabla 1.

 

TABLA 1
Principales micotoxinas que afectan al ganado porcino, especies fúngicas productoras, materias primas donde aparecen, límites máximos en piensos y sintomatología asociada.

DIAGNÓSTICO DE MICOTOXICOSIS EN GANADO PORCINO

TÉCNICAS DE DETECCIÓN

Las micotoxinas se pueden detectar y cuantificar utilizando ensayos basados en anticuerpos (inmunoensayos) o técnicas de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).

INMUNOENSAYOS

Entre los inmunoensayos disponibles, el más utilizado es el ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay).

Este método se fundamenta en la unión irreversible entre una sustancia antigénica, en este caso la micotoxina a detectar, y su correspondiente anticuerpo que está unido a una fase sólida (placa de 96 pocillos).
La unión antígeno-anticuerpo será revelada mediante una reacción enzimática colorimétrica.

Las técnicas de ELISA son rápidas, sencillas y de bajo coste, por lo que se utilizan como primer nivel de screening en piensos y materias primas para la alimentación animal.

En cambio, tienen menor sensibilidad y especificidad que las técnicas de HPLC.

HPLC-MS

La cromatografía liquida de alta resolución (HPLC) es una técnica que permite separar los diferentes componentes de una mezcla mediante el uso de una columna y una fase líquida solvente.

Los componentes de la muestra son transportados a través de la columna y son separados en función de sus interacciones iónicas para luego ser detectadas por un espectrómetro de masas (MS) (Figura 1).
El espectro obtenido se contrasta con una base de datos que se actualiza permanentemente.

El empleo de técnicas cromatográficas requiere un equipamiento sofisticado y una preparación de la muestra laboriosa.

En cambio, [registrados]es un método altamente sensible y selectivo que permite analizar micotoxinas y sus metabolitos a concentraciones muy bajas en piensos, materias primas y muestras biológicas complejas (suero o plasma, leche, orina y órganos).

FIGURA 1
HPLC-MS, cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas (Creado con BioRender.com).
La adición de secuestrantes de micotoxinas en el pienso es una estrategia habitual para mitigar sus efectos negativos, pero es importante tener en cuenta que pueden interferir en la detección de las micotoxinas mediante HPLC.
 Si, a pesar del uso de secuestrante, se detectan valores significativos de micotoxinas, se recomienda reevaluar el tipo y dosis de secuestrante utilizado

 MUESTRAS A ANALIZAR 

ALIMENTO

Habitualmente, el análisis de micotoxinas se realiza en muestras de pienso, materias primas o forrajes.
Esto permite determinar si los alimentos que están consumiendo los animales están contaminados con micotoxinas y en qué cantidad.

MUESTRAS BIOLÓGICAS

El análisis de muestras biológicas permite saber si los animales han ingerido y absorbido las micotoxinas.

  1. Es una herramienta de diagnóstico más precisa que relaciona la presencia de micotoxinas con la sintomatología presente en los animales.
  2. Este tipo de análisis es muy útil dado que es muy habitual no disponer del lote de pienso sospechoso cuando empiezan los signos y se establece la sospecha clínica de micotoxicosis. A esto se suma al hecho de que la distribución heterogénea de las micotoxinas en el pienso puede dar lugar a resultados falsos negativos cuando se analiza pienso.
  3. En caso de muestras biológicas es importante realizar análisis para detectar las micotoxinas y sus principales metabolitos (Tabla 1)

Es posible la detección de micotoxinas en una gran variedad de muestras:

Su análisis tiene gran interés por su repercusión sobre la salud de los lechones, ya que puede producir diferentes alteraciones como diarreas, disminución del crecimiento o vulvovaginitis.
Órganos: en caso de bajas, es posible estudiar la presencia de micotoxinas y sus metabolitos en órganos, siendo el hígado, el riñón y el músculo los más apropiados para el análisis.

Órganos: en caso de bajas, es posible estudiar la presencia de micotoxinas y sus metabolitos en órganos, siendo el hígado, el riñón y el músculo los más apropiados para el análisis.

  TOMA DE MUESTRAS Y CONSERVACIÓN  

PIENSO Y MATERIAS PRIMAS

El volumen mínimo a analizar es de 100 g, pero es importante tener en cuenta la distribución heterogénea de las micotoxinas en el alimento.
Por ello, se recomienda:

1. Muestrear diferentes puntos (submuestras del mismo silo).

2. Juntar las submuestras y homogenizar apropiadamente.

3. Enviar al laboratorio a temperatura ambiente una fracción de la muestra homogenizada.

MUESTRAS BIOLÓGICAS

Las muestras biológicas deben enviarse rápidamente al laboratorio en condiciones de refrigeración.

Si el envío se va a demorar, es necesario conservarlas congeladas para evitar la degradación de las micotoxinas hasta su análisis.

En caso de suero, es importante separar el coágulo de sangre antes de congelar, ya que la hemólisis puede interferir en el análisis.

 VALORES DE REFERENCIA 

PIENSOS

Actualmente, no existen valores de referencia sobre los límites máximos de micotoxinas para producción animal. Solo están legislados los niveles máximos de AFB1 en pienso por motivos de salud pública (consumo de leche contaminada).

Por ello, la Comisión Europea y la FDA han publicado recomendaciones sobre límites máximos de micotoxinas en piensos animales (Tabla 1). Sin embargo, estos límites son considerados demasiado laxos, ya que con concentraciones por debajo de ellos se pueden observar casos de micotoxicosis, especialmente en el caso de consumo crónico de alimento contaminado y combinación de varias micotoxinas.

FIGURA 2.
Tipo de muestras empleadas para la detección de micotoxinas, sus condiciones de obtención y envío a laboratorio, la información que aporta su análisis.

CASO CLÍNICO DE MICOTOXICOSIS EN UNA GRANJA PORCINA

ANAMNESIS Y CUADRO CLÍNICO

En una granja de cerdas reproductoras se observó un incremento de la mortalidad y cuadros entéricos.

ANÁLISIS LABORATORIAL

Se remitieron al laboratorio hisopos rectales de animales con clínica para el diagnóstico diferencial de las principales enfermedades que cursan con enteritis hemorrágicas en animales adultos:

Se detectó Lawsonia intracelullaris en una concentración alta, compatible con la enteritis hemorrágica que presentaban los animales.

Al analizar la presencia de micotoxinas en el pienso de lactación y gestación, se detectó una elevada concentración de fumonisinas y una baja concentración de aflatoxinas (Tabla 2).

IMAGEN 1
Enteritis necrótico-hemorrágica en una cerda adulta con muerte sobreaguda.

COMO SE HA COMENTADO PREVIAMENTE, LAS MICOTOXINAS TIENEN EFECTO SINÉRGICO

TALA 2
Detección de micotoxinas en pienso mediante HPLC-MS.

 DIAGNÓSTICO

Los cerdos presentan una mayor susceptibilidad a las fumonisinas, ocasionando problemas digestivos con reducción de la ingesta de alimento, retraso de crecimiento, disminución de la absorción intestinal y aumento de la permeabilidad intestinal, lo que permite el paso de agentes infecciosos y la absorción de otras micotoxinas, así como el aumento de la respuesta inflamatoria.

EL DIAGNÓSTICO FINAL DE ESTE CASO FUE ENTEROPATÍA HEMORRÁGICA PROLIFERATIVA POR LAWSONIA INTRACELULLARIS PREDISPUESTO POR UNA INTOXICACIÓN POR FUMONISINAS

Las micotoxicosis tiene gran relevancia en producción porcina, pero sigue estando en muchas ocasiones infradiagnosticadas. El análisis de micotoxinas en muestras biológicas mediante HPLC-MS es una nueva herramienta para llegar a diagnósticos más certeros y precisos.

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BIBLIOGRAFÍA
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