Gripe Porcina – Diagnóstico & monitorización

La duración de la infección se estima entre 5 y 7 días desde su inicio, con picos de carga vírica entre el tercer y quinto día de infección. Esto hace que sea muy complicado poder detectar a tiempo al virus en un animal infectado.

Un primer aspecto que se debe tener en cuenta para el diagnóstico de la enfermedad es saber frente a qué forma epidemiológica nos encontramos.

En la actualidad, la gripe porcina se encuentra básicamente de dos formas en las explotaciones porcinas:

• Epidémica 
• Enzoótica/recurrente

FORMA EPIDÉMICA

La forma epidémica suele producirse cuando se introduce una nueva cepa del virus en una explotación para la cual no existe inmunidad previa en la población.

Ante esta situación nos encontraremos con animales infectados en cualquier fase en la granja, y nos llamará especialmente la atención:

• Presencia de fiebre alta (>40 ºC) en todos los animales afectados
• Tos seca
• Secreciones nasales no purulentas
• Disnea (jadeo muy pronunciado)
• Incluso abortos en cerdas gestantes de cualquier paridad causados por la fiebre (el virus de la gripe no es capaz de infectar a los fetos puesto que no genera viremia)

El muestreo de elección para estos casos es la obtención de hisopos nasales para realizar RT-PCR en animales que presenten estos signos clínicos, especialmente la fiebre, por lo que es imprescindible tomar la temperatura rectal para seleccionar los animales que se han de muestrear.

La neumonía bronquiolo-intersticial es la misma lesión que causa Mycoplasma hyopneumoniae, por lo que hay que tenerlo en cuenta en el diagnóstico diferencial.

Es recomendable enviar los pulmones al laboratorio, ya que el virus suele detectarse (por RT-PCR) o aislarse (en cultivo celular o huevo embrionado de pollo) fácilmente en caso de estar presente.

Otra técnica que puede realizarse a partir de los pulmones es la inmunohistoquímica, que tiene la ventaja de poder asociar la presencia de virus con la lesión a nivel microscópico, pero no es tan práctica y rápida como la RT-PCR desde un punto de vista de diagnóstico.

En caso de no encontrar animales RT-PCR positivos (muestreo demasiado tarde) puede ser recomendable obtener muestras pareadas en animales jóvenes (animales de transición a 6-7 semanas de vida/cerdas de reposición de origen externo negativo) (Foto 1) que acaben de sufrir el cuadro clínico y 21 días después.

Foto 1. Se pueden obtener muestras en animales de transición que acaben de sufrir el cuadro clínico

Obtener muestras pareadas en animales jóvenes nos permitirá determinar si existe seroconversión frente al virus de la gripe ya sea de forma genérica al tipo A (por ELISA) o específica a subtipo (por inhibición de la hemaglutinación)

Las muestras pareadas en cerdas multíparas o en animales de engorde no suelen aportar demasiada información, ya que el 75% y 50% de estos animales ya son seropositivos, respectivamente.

FORMA ENZOÓTICA

En aquellas situaciones en las que existe cierta inmunidad previa en la población, el virus de la gripe suele establecer un ciclo enzoótico de infección con menor incidencia que en la forma endémica.

Ante esta situación, el virus suele mantenerse en ciclos de infección recurrentes en animales susceptibles.

Por tanto, el muestreo de estas subpoblaciones de animales susceptibles será fundamental en esta forma.

A día de hoy se considera que el principal reservorio del virus en una explotación endémica son los animales en maternidad. Ello se debe al hecho de que los anticuerpos maternales protegen ante la clínica pero no ante la infección.

La interferencia con anticuerpos maternales hace que un animal infectado en esta fase no desarrolle anticuerpos frente al virus, por lo que las muestras pareadas no son de utilidad.

En otras fases, como la transición o el engorde, la desaparición de anticuerpos maternales deja a los animales susceptibles a la infección, de ahí que aparezcan cuadros respiratorios de tipo “recurrente” en estos animales.

Si la clínica es evidente (tos seca o fiebre), es recomendable realizar un muestreo dirigido mediante hisopos nasales.

En esta fase, las bajas suelen deberse a complicaciones bacterianas secundarias, por lo que la necropsia solo nos indicará cuáles son las infecciones concomitantes presentes en la explotación pero no tendrán un valor diagnóstico en cuanto a gripe.

Al tratarse de una muestra agregada (obtenida a partir de varios animales), no debería utilizarse para realizar la caracterización del virus.

En caso de que se desee, es recomendable determinar qué corrales son positivos mediante cuerdas y volver a muestrear individualmente los animales mediante hisopos nasales en una proporción determinada de los animales presentes en el corral al cabo de pocos días (2-3 días).

Población de reposición

Otra población que hay que tener muy en cuenta ante la forma enzoótica es la reposición, especialmente en aquellos casos en los que llegue de un origen negativo externo (Foto 2).

Foto 2. Frente a la forma enzoótica hay que tener muy en cuenta a la población de reposición

Foto 3. Las muestras de sangre permiten evaluar la seroconversión

En estos animales puede ser también de gran utilidad obtener muestras pareadas de sangre con el fin de evaluar la seroconversión, ya que con total seguridad partirán de la ausencia de anticuerpos a títulos elevados debidos a la infección (Foto 3).

Finalmente, hay que insistir en que para el aislamiento y la caracterización (ya sea mediante secuenciación o determinación del subtipo o el linaje de hemaglutinina o neuraminidasa por RT-PCR) es imprescindible trabajar a partir de muestras individuales, ya que en ocasiones podemos detectar más de una cepa de virus de la gripe en la misma población, lo que imposibilita la interpretación de resultados a partir de muestras agregadas o pooles.

Proyecto de investigación

Actualmente, el Departamento de Sanidad y de Anatomía Animal de la Universidad Autónoma de Barcelona e IDT Biologika han iniciado un proyecto de investigación con el fin de determinar la diversidad genética de los virus de la gripe porcina presentes a día de hoy en la cabaña porcina de la península ibérica, así como estudiar la epidemiología y el impacto de estos virus frente a distintos escenarios o formas de la enfermedad.

Como ya se ha comentado en este artículo, en determinadas ocasiones es difícil llegar a detectar el virus, especialmente en aquellas explotaciones donde se observa la enfermedad en su forma enzoótica sin presencia de una clínica compatible aparentemente.

PROYECTO INFLUENZA

Lab. Infeccioses – Fac. Veterinaria Campus UAB

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