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15 Feb 2021
Criopreservación de células de la granulosa para el desarrollo in vitro de ovocitos
Las células de la granulosa contribuyen al desarrollo de los ovocitos, por lo tanto se estudio el efecto de la criopreservación sobre la capacidad de estas células para apoyar este desarrollo.
Las células de la granulosa (GC) contribuyen al desarrollo de los ovocitos.
Objetivo
El presente estudio abordó el efecto de la criopreservación sobre la capacidad de las células de la granulosa para apoyar el desarrollo de ovocitos. Las GC se recolectaron de folículos antrales.
Métodos y materiales
Los complejos de células de la granulosa de ovocitos (OGC) derivados de folículos antrales tempranos se cultivaron con GC frescas adicionales o GC congeladas-descongeladas durante 14 días, y se examinó la capacidad de desarrollo y las características de los ovocitos cultivados in vitro .
Además, se cultivaron GC frescas o congeladas-descongeladas durante dos días y se examinaron los efectos de la criopreservación sobre las características de las GC.
Resultados
La capacidad de desarrollo de los blastocistos y los niveles de acetilación de H4K12 en ovocitos cultivados in vitro no difirió significativamente entre las tres condiciones de cultivo: OGC cultivadas con GC frescas adicionales, GC congeladas-descongeladas o sin GC adicionales.
Aunque tanto los GC frescas como las congeladas-descongeladas exhibieron un mayor contenido de ATP en comparación con el de los ovocitos desarrollados sin GC adicionales, solo los GC frescos mostraron un contenido de lípidos significativamente mayor en los ovocitos cultivados in vitro.
El contenido de ATP, el contenido de oxígeno reactivo, el potencial de membrana mitocondrial y el número de copias de ADN mitocondrial fueron mayores en las GC cultivadas congeladas y descongeladas en comparación con las GC frescas.
En contraste, el contenido de lípidos de las GC congeladas-descongeladas cultivadas fue menor que el de las GC frescas. Tanto las GC frescas como las congeladas apoyan el crecimiento de los ovocitos, pero la criopreservación cambia las propiedades de las GC de una manera que afecta el estado energético de los ovocitos cultivados in vitro.
Conclusión
La adición de células de la granulosa a los sistemas de cultivo favorece el crecimiento de ovocitos derivados de los primeros folículos antrales, además la criopreservación reduce la capacidad de las células de la granulosa para apoyar el crecimiento de los ovocitos y cambia las actividades mitocondriales en las células de la granulosa.
