La interacción entre Lawsonia intracellularis y otros patógenos entéricos puede favorecer la aparición de disentería en cerdos, comprometiendo la salud intestinal y el rendimiento productivo.
Las enfermedades entéricas en cerdos son una de las principales causas de pérdidas económicas en el sector porcino debido a su impacto en la salud y el rendimiento de los animales.
Estas patologías, a menudo atribuidas a un solo patógeno, también están influenciadas por la microbiota intestinal, que desempeña un papel clave en la colonización y severidad de las infecciones.
Entre las enfermedades más prevalentes se encuentran:
La DP se caracteriza por diarrea severa con contenido sanguinolento, deshidratación y, en casos graves, muerte.
Por su parte, la EPP tiene manifestaciones agudas, crónicas y subclínicas, con lesiones que incluyen hiperplasia de enterocitos inmaduros y engrosamiento de la mucosa intestinal, afectando el intestino delgado y grueso.
Coinfecciones entre B. hyodysenteriae y L. intracellularis se han reportado con creciente frecuencia, aunque las interacciones entre estos patógenos no han sido completamente investigadas.
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Para este primer estudio, se seleccionaron 45 lechones de 4 semanas de edad provenientes de una granja sin antecedentes de infección por Brachyspira spp., L. intracellularis o Salmonella spp.
Los animales fueron divididos en cuatro grupos:
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Para la infección experimental se prepararon inóculos de ambos agentes patógenos
Posteriormente, se evaluó la consistencia fecal diariamente utilizando una escala de 0 (normal) a 3 (diarrea severa), con 0,5 puntos adicionales si se observaba moco o sangre.
Tras la eutanasia de todos los animales el día 21 dpi, se realizaron necropsias completas, recolectando fragmentos del intestino delgado y grueso para evaluaciones histopatológicas y tinciones inmunohistoquímicas.
La secuenciación del gen 16S ARNr se realizó para evaluar cambios en la microbiota antes (-5 dpi) y después (21 dpi) de la infección.
La diarrea severa fue más frecuente en el grupo CO (11/12 animales) a partir del día 12 dpi, mientras que en el grupo BRA afectó a 5/11 cerdos desde el día 14 dpi.
En el grupo LAW, la diarrea fue menos severa y transitoria. Se registraron muertes en dos animales del grupo CO y uno del grupo BRA debido a colitis fibrinonecrótica severa.
Macroscópicamente, en el grupo CO las lesiones incluyeron colitis mucohemorrágica difusa moderada a severa en 10/12 animales. Mientras, en el grupo BRA se observaron colitis fibrinosas multifocales en 4/11 animales, y aparecieron lesiones mínimas (hiperemia) en el grupo LAW.
Desde el punto de vista microscópico, las lesiones fueron más severas en el grupo CO, con necrosis superficial, abscesos en las criptas intestinales y proliferación de células caliciformes. En el grupo BRA se observaron inflamación neutrofílica moderada y hemorragias focales (Imagen 1).
Imagen 1. Lesiones macroscópicas observadas en la necropsia.
(a) Animal del grupo CO con marcado edema de mesocolon (flecha).
(b) Animal del grupo CO con una severa colitis catarral difusa con áreas de fibrina y necrosis hemorrágica (flechas).
(c) Animal del grupo BRA con exceso de moco asociado con una hemorragia multifocal de la mucosa.
(d) Animal del grupo NEG con un aspecto macroscópico normal del colon. Daniel, A.G.S et al. 2023
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Tras el cultivo de las muestras procedentes de cada animal involucrado en el estudio, se aisló B. hyodysenteriae en el 92% de los cerdos del grupo CO, y en el 45% en el grupo BRA, mientras que el cultivo fue negativo para los otros 2 grupos (Gráfica 1).
Gráfíca 1. Brachyspira spp. aislamiento de heces/raspado de intestino grueso por grupo. Letras diferentes indican diferencias estadísticas (p<0,05) entre grupos. |
Se detectaron las primeras qPCR positivas para L. intracellularis en los grupos CO y LAW a 3 dpi (Gráfica 2). El último día de la evaluación (21 dpi) todos los animales de ambos grupos dieron positivo para L. intracellularis.
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Se detectó qPCR para B. hyodysenteriae en el grupo CO en 10 de los 12 animales positivos 10 dpi (3 días después de la inoculación de B. hyodysenteriae). En el grupo BRA, 7 de 11 cerdos dieron positivo en qPCR y comenzaron a eliminar a los 10 dpi y 3 días después de la inoculación con B. hyodysenteriae.
Gráfíca 2. Media de qPCR para L. intracellularis y B. hyodysenteriae durante el experimento. PCR cuantitativa mediante curva estándar. Sin diferencia de excreción entre grupos inoculados. Letras diferentes indican diferencias estadísticas (p<0,05) entre grupos en diferentes días posteriores a la infección (dpi). |
La diversidad microbiana disminuyó significativamente en el grupo CO, destacándose géneros como Prevotella, Fusobacterium y Desulfovibrio. En el grupo LAW, se observó mayor abundancia de Megasphaera y Dialister, mientras que en el grupo NEG predominó Odoribacter, asociado con un estado de homeostasis intestinal correcto.
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En un estudio presentado por la Universidad de Minnesota al último congreso IPVS 2024, se evalúa el efecto de la vacunación intramuscular frente a L. intracellularis en la coinfección por B. hyodysenteriae.
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V-CO: vacunados y coinfectados (n=21). P-CO: placebo, es decir, no vacunados y coinfectados (n=18). V-LAW: vacunados e infectados con L. intracellularis (n=21). P-LAW: placebo e infectados con L. intracellularis (n=12). NC: no vacunados ni desafiados (n=8). |
Los desafíos tuvieron lugar a los 22 días posvacunación frente a L. intracellularis (0 dpi) y una semana después para B. hyodysenteriae (7dpi).
En este contexto se evaluaron los signos clínicos (respecto a un score de heces), la presencia de antígeno por inmunohistoquímica en fragmentos de íleon tras necropsia de todos los animales 21 dpi, y los niveles de IgG en suero por IPMA (Inmunoperoxidasa en Monocapa) en ambos casos frente a L. intracellularis.
Los animales coinfectados, independientemente del estatus de vacunación, tuvieron signos clínicos (diarrea) más evidentes que los animales infectados solo por L. intracellularis.
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Además, la inmunohistoquímica mostró que en los animales vacunados se reduce la infección a nivel del íleon en ambos grupos vacunados frente al placebo.
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La coinfección por B. hyodysenteriae y L. intracellularis exacerba los signos clínicos y las lesiones intestinales, probablemente debido a un efecto inmunosupresor de L. intracellularis que facilita la colonización de B. hyodysenteriae.
La alteración de la microbiota intestinal en el grupo CO refuerza la importancia del equilibrio microbiano en la patogénesis de estas infecciones.
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Las coinfecciones de L. intracellularis con otros patógenos no se reducen solo a B. hyodysenteriae, sino que ha podido ser demostrado un efecto sinérgico en la infección con otros agentes como Salmonella spp. o Trichuris suis.
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La coinfección entre B. hyodysenteriae y L. intracellularis genera efectos sinérgicos en términos de signos clínicos más graves, así como una mayor intensidad de lesiones macroscópicas e histológicas. La hipótesis de los investigadores es que L. intracellularis es un factor inmunosupresor que favorece la colonización por B. hyodysenteriae.
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Daniel, A.G.S et al. Synergic Effect of Brachyspira hyodysenteriae and Lawsonia intracellularis Coinfection: Anatomopathological and Microbiome Evaluation. Animals 2023, 13, 2611. https://doi.org/10.3390/ani13162611
Vanucci, F. et al. Ileitis vaccination: assessment of immune response and clinical signs in pigs co-infected with Lawsonia intracellularis and Brachyspira hyodysenteriae. IPVS 2024
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